Общая характеристика бабезиозов животных
Бабезиозы (пироплазмозы), широко распространенные тяжелые инвазии диких и домашних животных, известны еще с библейских времен. В эндемичных зонах зараженность скота бабезиями достигает 70-100 % и приносит существенный ущерб животноводству. Тяжелые заболевания, нередко с летальным исходом, вызывают эти возбудители у собак. Бабезиозы человека впервые начали диагностировать с конца 50-х годов прошлого века в Европе (возбудитель Babesia divergens). Несколько позже, с конца 60-х годов, заболевания с возбудителем B. microti выявлены в США. Позднее бабезиозы человека были обнаружены в других странах Америки, в Азии и Африке (в Бразилии, Мексике, Китае, на Тайване, в Японии, в Египте и др.). В последние десятилетия бабезиозы приобретают все большее значение в качестве новых болезней человека и мелких домашних животных.
Бабебиоз вызывают: у лошадей Babesia caballi (piroplasma caballi), B. equi (Nuttallia equi); у крупного рогатого скота - В. bovis (Fransaiella colchica), B. bigemina (P. bigeminum), B. divergens (B. bovis); у овец и коз - B. ovis, B. motasi (P. ovis); у собак - B. canis (P. canis). Тейлериоз вызывают: у крупного рогатого скота - Theileria annulata и Th.sergenti; у овец и коз - Th. ovis. Заболевания протекают остро, подостро, хронически и сопровождаются лихорадкой, анемией, желтушностыо и кровоизлиянием на слизистых оболочках, гемоглобинурией (при бабезиозе), увеличением лимфатических узлов (при тейлериозе) и заканчиваются нередко гибелью.
Переносчиками бабезий служат клещи почти всех родов сем. Ixodidae (н/сем. Ixodoidea, отр. Parasitiformes). Как переносчики бабезиозов домашних животных наиболее известны клещи родов Dermacentor, Rhipicephalus, Hyalomma. Переносчиками бабезий, патогенных для человека, являются преимущественно клещи рода Ixodes, группы I. ricinus - I. persulcatus. Установлено наличие ограниченных трансфазовой и трансовариальной передач бабезий в этих клещах, осуществляющихся далеко не всегда. Резервуарами бабезий служат различные крупные и мелкие млекопитающие.
Основной путь заражения позвоночных, в том числе человека – передача бабезий со слюной при питании клеща. Четко выраженная сезонность заболеваемости (май-сентябрь) обусловлена сезонной активностью переносчиков. Достаточно высоким считается риск заражения при переливании крови от доноров с бессимптомным или хроническим течением болезни, причем не только в эндемичных зонах. Известны случаи трансплацентарного заражения плода.
Установлено, что бабезиозом болеют, главным образом, животные с пониженным иммунным статусом (старые, спленэктомированные, перенесшие тяжелые заболевания). У тех же групп риска отмечаются более тяжелые формы болезни. У людей с нормально функционирующей иммунной системой заболевание обычно протекает бессимптомно, несмотря на наличие паразитемии, достигающей 1-2 %.
Описание возбудителя.
Бабезия (лат. Babesia, (пироплазма (Piroplasma)) — род простейших отряда Пироплазмид, класса Саркодовых (или Споровики).
Название дано в 1893 в честь румынского учёного В. Бабеша, впервые обнаружившего в 1888 паразитов в крови крупного рогатого скота.
Некоторые авторы разделяют род бабезии на 4 рода или подрода (Piroplasma, Nuttallia, Babesiella, Francaiella).
Бабезии — кровепаразиты крупного рогатого скота, лошадей, овец, свиней, собак, грызунов; вызывают тяжёлые заболевания — бабезиозы.
Бабезии переносятся клещами, в организме которых размножаются бесполым путём в просвете кишечника или внутри клеток. При этом образуются формы бабезий, проникающие в яйцеклетки клеща и продолжающие там бесполое размножение. Из таких заражённых яиц клеща выходят личинки с бабезиями во всех органах и слюнных железах. При кровососании бабезии попадают в организм позвоночного животного, где внедряются в эритроциты.
Общая характеристика рода Babesia. Известно более 100 видов, относящихся к роду Babesia. Два из них - Babesia microti и Babesia divergens - служат причиной большинства случаев бабезиоза у человека. Переносчики - иксодовые клещи, в частности Ixodes scapularis (он же Ixodes dammini) и Ixodes ricinus.
Клещи заглатывают бабезий во время кровососания, после чего паразиты размножаются в стенке кишечника и мигрируют к слюнным железам клеща. Цикл завершается, когда личинка, нимфа или имаго (взрослый клещ) вновь кусает животное или человека. Во время бесполого размножения внутри эритроцитов возбудитель образует 2 или 4 дочерних клетки.
В некоторых природных очагах более 2% населения имеют антитела к бабезиям. Это показывает, что бессимптомный бабезиоз распространен значительно шире, чем принято считать.
Иксодовые клещи. Иксодовые клещи — переносчики возбудителей пироплазмидозов (гемоспоридиозов) домашних животных, принадлежат к семейству Ixodidae. В зависимости от природно-климатических условий клещи обитают в лесной, в степной, в предгорной зонах и т. д.
Иксодиды — сравнительно крупные клещи. Размеры их колеблются от 2 мм (голодных) до 20 мм (насосавшихся самок). По величине дорсального щитка легко отличать самцов от самок: у самцов он покрывает всю верхнюю поверхность, а у самок, а также у личинок и нимф — только переднюю часть тела. В передней части тела расположены ротовые органы, которые образуют хоботок. При помощи хелицер клещ разрезает кожу животного перед насасыванием крови; гипостом, вооруженный зубчиками, острием направленными назад, является органом фиксации; пальпы служат органом осязания.
Обычно на теле животных самцы иксодид оплодотворяют самок, которые после насасывания крови отпадают, заползают в укрытия и в зависимости от условий внешней среды и степени насыщения кровью через 10—20 дней откладывают от 4 тыс. до 15 тыс. яиц, после чего погибают. Яйца клещей сравнительно крупные (около 0,5 мм), овальной формы, желто-бурого цвета, покрытые твердой оболочкой, незрелые. Яйца созревают в течение нескольких недель. Через образовавшуюся трещину в оболочке яйца выводится личинка около 1 мм длиной, имеющая три пары ног и лишенная дыхалец, полового отверстия и перитрем. Для превращения в следующую стадию личинка должна насосаться крови. Нимфа имеет четыре пары конечностей, но лишена полового отверстия. После насасывания крови нимфа открепляется от хозяина и падает на землю или на теле животного превращается в имаго. Таким образом, для полного развития от яйца до половозрелой стадии иксодовые клещи три раза насасываются крови у нескольких или одного животного и дважды линяют. Длительность сосания крови личинками в среднем 3—7 дней, нимфами - 3—10, имаго — 8—10 дней.
Морфология возбудителя. Babesia bovis — средняя гемоспоридия (до 2,5 ц). В эритроцитах встречаются разные формы паразита, но преобладают кольцевидные. Характерная форма бабезий — парные грушевидные образования, соединенные узкими концами под тупым углом и расположенные на периферии эритроцитов. Зараженность эритроцитов бабезиями колеблется от 15 до 40 %.
B. divergens известен как патоген домашнего скота. Широко распространен в Европе: от Скандинавии до Средиземноморья, повсеместно в пределах ареала основного переносчика – клеща I. ricinus. Зараженность клещей составляет в среднем 0,9-3 %. Позвоночными хозяевами этого вида бабезий являются крупный рогатый скот и дикие копытные – косуля (Capreolus capreolus), лань (Cervus dama), благородный олень (C. elaphus), северный олень (Rangifer tarandus). У этих животных паразитемия без явных клинических признаков может продолжаться в течение нескольких лет и являться источником заражения клещей. Случаи манифестации бабезиоза у скота довольно редки, хотя паразиты и/или антитела отмечаются у большинства животных. Сравнительно недавно B. divergens (или новый близко родственный вид) обнаружен в США.
Описание возбудителей рода Babesia, паразитирующих у домашних животных.
|
Возбу-
дитель
|
Форма
|
Размер парных
грушевидных
форм к радиусу
эритроцита
|
Угол
соеди-
нения
парных
форм
|
Локали-
зация
|
Пути переноса инфекции
|
|
Вabesia
caballi
(лошади)
|
Овальная,
кольцевидная,
круглая, амебовидная,
грушевидная
|
Больше
|
Острый
|
В центре
эритроци-
тов
|
Dermacentor, Hyalomma и Rhipicephalus spp
|
|
В. equi
(лошади)
|
Овальная, кольцевидная,
грушевидная,
крестовидная
|
Меньше,
равны
|
-
|
Чаще в
центре
эритроцитов,
клетках
лимфо-
идной
ткани
|
Dermacentor, Hyalomma
|
|
В. bovis
(скот)
|
Кольцевидная,
амебовидная,
грушевидная
|
Равны
|
Тупой
|
В центре
эритроци-
тов
|
B. annubtus, B.microplus, Ixodes spp. (?)
|
|
В.bige-
mina
(скот)
|
Овальная, кольцевидная,
круглая, амебовидная,
грушевидная
|
Больше
|
Острый
|
В центре
эритроци-
тов
|
Boophilus annulatus, B. decoratus, B. microplus
|
|
B. ovata
(скот)
|
Подобны B.bigemina
|
|
|
|
H. longicornis
|
|
В. diver-
gens
(скот, человек)
|
Круглая, амебовидная,
грушевидная
|
Меньше
|
Тупой
|
По пери-
ферии
эритроци-
тов
|
Ixodes ricinus
|
|
В. ovis
(овцы и козы)
|
Кольцевидная,
круглая,
грушевидная
|
Меньше
|
Тупой
|
В центре
эритро-
цитов
|
I. ricinus (?), D. reticulatus (?). R bursa
|
|
В. motasi
(овцы и козы)
|
Круглая, овальная,
амебовидная,
грушевидная
|
Больше
|
Острый
|
В центре
эритро-
цитов
|
D. silvarum (?), R bursa, Haemaphysalis spp
|
|
В. canis
(собаки)
|
Кольцевидная,
овальная,
амебовидная,
грушевидная
|
Больше
|
Острый
|
В центре
эритро-
цитов
|
|
|
B. major
(скот)
|
Кольцевидная, грушевидная
|
Больше
|
|
|
Haemaphysalis punctata
|
|
B. jakimovi
(скот и дикие жвачные)
|
Подобны B. major
|
|
|
|
I. ricinus
|
|
B. trautmanni
(свиньи)
|
Удлиненные
|
Больше
|
Острый
|
|
R.sanguineus, Boophilus, Hyalomma, Dermacentor
|
|
B. perroncitoi
(свиньи)
|
Кольцевидные
|
|
|
|
Пути перноса неизвестны
|
В отличие от малярийных плазмодиев бабезии не образуют пигмента, у них нет эритроцитарной шизогонии и не образуются гаметоциты. Делясь внутри эритроцита, Babesia может образовать 4 дочерних паразита, скрепленных тяжами цитоплазмы. Хотя такие «тетрадные» формы в человеческой крови обнаруживают редко, это - отличительный признак инфекции.
Сложный цикл развития бабезий проходит частично в позвоночных, частично – в клещах-переносчиках. В организме позвоночного хозяина бабезии паразитируют в эритроцитах, где размножаются бинарным делением или почкованием. Форма паразитов может быть кольцевидной, овальной, амебоидной, точковидной, ланцетовидной, грушевидной. Характерно образование парных грушевидных образований, соединенных тонким цитоплазматическим мостиком, угол расхождения между которыми (острый, тупой) служит систематическим признаком. Размеры эритроцитарных стадий обычно сравнивают с радиусом эритроцита (меньше, равны или больше). По размеру эритроцитарных стадий виды бабезий разделяются на мелкие (1,0-2,5 мкм) и крупные (2,5-5,0 мкм). Эти морфологические различия подтверждаются филогенетическими характеристиками. В одном эритроците одновременно могут находиться от 1 до 3-4, а иногда и более особей паразитов. Располагаются они преимущественно на периферии эритроцитов. Зараженность эритроцитов может достигать 40-85 %, но обычно не превышает 7-15 %. Быстро размножающиеся паразиты покидают эритроциты хозяина, которые при этом разрушаются, и проникают в новые эритроциты. Наряду с эритроцитарными стадиями в плазме крови иногда встречаются внеклеточные стадии, обычно округлой или неправильной формы. Природа этих стадий не ясна.
В организме клеща бабезии проходят сложное развитие. Попав в кишечник клеща вместе с эритроцитами позвоночного хозяина, бабезии покидают их и начинают размножаться в просвете кишечника бинарным или асинхронным множественным делением, образуя амебоидные или округлые формы, достигающие 30-45 мкм и содержащие от 2 до 250 ядер. Одноядерные особи, образовавшиеся в результате их деления, растут и трансформируются в крупные булавовидные стадии.
В эпителиальных клетках кишечника клеща бабезии претерпевают множественное деление, в результате чего вновь формируются булавовидные стадии, которые, в свою очередь, проникают в новые эпителиальные клетки. Этот процесс продолжается некоторое время, затем постепенно затухает. Булавовидные стадии проникают в гемолимфу, где, по-видимому, также происходит множественное деление. Из гемолимфы они мигрируют в различные органы клеща, в том числе в яичники и слюнные железы, где размножаются бинарным и множественным делением. Булавовидные стадии заполняют гипертрофированные клетки слюнных желез, формируя многоядерные споробласты. Однако эти стадии заразить хозяина не могут. Инвазионными стадиями бабезий являются мелкие одноядерные спорозоиты, процесс развития которых происходит в слюнных железах и стимулируется лишь началом питания клеща. В связи с этим передача возбудителя от клеща к позвоночному, как правило, может осуществляться лишь со второго дня кровососания. Но иногда зрелые спорозоиты встречаются в слюнных железах голодных клещей.
Патанатомия и патогенез.
Пироплазмиды, как и другие паразиты, находятся в антагонистических отношениях с хозяином. Степень патологических изменений у животных при пироплазмидозах зависит от болезнетворного влияния паразитов и реактивности организма хозяина.
Возбудитель болезни попадает в организм восприимчивого животного со слюной клеща-переносчика во время питания на животном. Размножение возбудителей бабезиоза в организме восприимчивого животного происходит в эритроцитах капилляров внутренних органов, затем в эритроцитах кровяного русла. Паразиты питаются за счет эритроцитов путем осмоса.Развитие патологического процесса происходит постепенно, по мере размножения в эритроцитах и лимфоцитах животного пироплазмид и увеличения их механического и токсического воздействия. В инкубационный период болезнь клинически не проявляется. По мере увеличения в организме инвазированного животного количества пироплазмид и продуктов их жизнедеятельности нарушается функциональная деятельность органов и становятся заметными клинические признаки болезни.
Основное значение в патогенезе пироплазмидозов имеет разрушение паразитами клеток крови (эритроцитов, лимфоцитов и моноцитов), что ведет к резкому уменьшению количества эритроцитов (более 50%), гемоглобина и развитию гемолитической анемий. Освобождающийся при разрушении эритроцитов гемоглобин в печени перерабатывается в желчные пигменты, обусловливая желтушность слизистых оболочек и подкожной клетчатки, а также удаляется из организма с мочой (гемоглобинурия). При нарушении деятельности почек появляются симптомы альбуминурии (белок в моче).
Выделяемые паразитами продукты межуточного обмена вызывают нарушение функции органов кроветворения, нарушается кровообращение, возникает застой в малом кругу кровообращения, появляется одышка, на почве застойных явлений происходит расстройство деятельности внутренних органов, нарушается обмен веществ, возникает порозность стенок сосудов и появляются кровоизлияния на слизистых, серозных оболочках, во внутренних органах; расстройство работы сердца и других органов
часто приводит к отеку легких, затем и к гибели животного.
Течение пироплазмидозов осложняют аллергические реакции, проявляющиеся повышенной раздражимостью нервных рецепторов и резким нарушением обмена веществ.
Патанатомия. При вскрытия часто обнаруживают желтушность тканей, кровоизлияния на серозных и слизистых оболочках и в мышце сердца. Лимфатические узлы, селезенка увеличены, с кровоизлияниями, печень увеличена, желчный пузырь растянут, мочевой пузырь наполнен мочой красноватого цвета (при бабезиозе), в слизистых оболочках сычуга, иногда кишечника, имеются язвы (при тейлериозе).
Клинические признаки бабезиоза крупного рогатого скота.
Первые признаки болезни проявляются через 8-12 дней после нападения зараженных клещей. У животных отмечают высокую температуру, угнетение, потерю аппетита, анемию, нередко желтушность, гемоглобинурию, нарушение функции сердца, желудочно-кишечного тракта и других органов, изменяется морфологический состав крови.
Продолжительность болезни 1-3 недели, выздоровление проходит медленно. Переболевшие животные длительное время остаются носителями возбудителей и в течение всего этого периода они невосприимчивы к повторному заражению одноименным возбудителем при ежегодном с ним контактировании.
При заражении B. microti инкубационный период составляет 1-3 недели, иногда до нескольких месяцев. Преобладает бессимптомное или мягкое течение болезни, реже отмечается тяжелая клиника с летальным исходом, особенно среди наиболее старых животных (до 5%). В первом случае у инвазированных свинок с бабезиями в крови клинические признаки отсутствуют. При мягком течении наблюдаются кратковременные проявления (озноб, лихорадка, анемия, слабость). У лактирующих самок уменьшается или почти полностью прекращается отделение молока. Молоко имеет красноватый оттенок.
При тяжелом течении болезни острая гемолитическая лихорадка с высокой температурой сопровождается гемоглобинемией, гемоглобинурией, почечной недостаточностью с развитием анурии. Количество зараженных эритроцитов колеблется от незначительного (менее 1%) в начале инфекции до 50-70% в случае тяжелой инфекции. Клинические проявления обычно возникают, когда число пораженных эритроцитов достигает 3-5%. При исследовании крови от больного животного отмечают уменьшение количества эритроцитов и гемоглобина, увеличение числа лейкоцитов в основном за счет лимфоцитов; обнаруживают палочкоядерные и юные формы лейкоцитов.
Острая фаза болезни может перейти в хроническую с длительным периодом перемежающейся лихорадки, слабостью, отсутствием аппетита, болью в мышцах, сухим кашлем, утомляемостью.
Бабезиоз, вызываемый B. divergens, напротив, отличается тяжелым течением. Клиническая картина включает острую лихорадку, боли в животе, сильные мышечные боли, гемоглобинурию, желтуху. Отмечается, что без немедленного лечения заражение B. divergens неминуемо ведет к гибели животного, но и при интенсивном специфическом лечении смертность достаточно высока.
Средства диагностики.
Диагностика основывается на обнаружении в окрашенных краской Гимзы мазках периферической крови внутриэритроцитарных паразитов. Как и в случае малярийных плазмодиев, ядро окрашивается в красный цвет, цитоплазма — в синий; диаметр клетки от 2 до 3 мкм. Однако в отличие от возбудителей малярии гамонты не образуются, пигмент отсутствует. Поскольку бабезии размножаются путем несинхронного почкования, они отличаются выраженным плеоморфизмом; в одном эритроците могут находиться несколько паразитов на разных стадиях развития. Ценными диагностическими признаками являются уникальная форма паразита в виде корзинки, присутствие тетрады возбудителей в одном эритроците и наличие множественных зерен хроматина.
При интенсивных инфекциях бабезии можно увидеть за пределами эритроцитов. Диагноз устанавливают серологическими методами с помощью непрямой реакции флюоресцирующих антител и иммуноферментным анализом. Корреляции между уровнем титров и тяжестью течения заболевания не отмечается; могут наблюдаться перекрестные реакции с другими видами бабезий, однако титры реакций с гомологичными антигенами обычно бывают выше.
Описаны случаи активной инфекции при отрицательных результатах исследования мазков крови и положительных серологических реакциях, что доказывалось путем заражения экспериментальных животных.
1. Диагноз на бабезиозы ставят на основании клинических эпизоотологических, патологоанатомических данных и результатов микроскопического исследования. Лабораторные исследования на пироплазмидозы включают: микроскопию мазков крови, внутренних органов, головного мозга, пунктатов лимфатических узлов; дифференциацию возбудителей.
2. Отбор и пересылка материала для исследования.
2.1. В лабораторию для исследования направляют: от подозреваемых в заболевании или больных животных - тонкие мазки крови из периферических сосудов уха; от павших или убитых - часть печени, легких, селезенки, почки, гепатита головного мозга и лимфатические узлы.
2.2. Мазки крови берут в период развития симптомов болезни, при повышенной температуре, до применения специфического лечения. Перед отбором материала у животного шерсть на месте взятия крови выстригают, кожу тщательно протирают в начале ватным тампоном, смоченным в растворе спирта, а затем сухим. Стерильной иглой делают прокол вены ушной раковины или ножницами надрезают край верхушки уха. К свободно выступившей капле крови легко прикасаются поверхностью сухого обезжиренного предметного стекла. Затем стекло быстро поворачивают вверх каплей и удерживают пальцами, левой руки в горизонтальном положении. Шлифованным краем другого предметного или покровного стекла прикасаются к капле крови. Как только кровь равномерно распределится по ребру этого стекла, его быстро проводят по поверхности стекла справа налево под углом 45°. Ширина мазка должна быть уже предметного стекла. Для каждого нового мазка берут свежую каплю крови. От каждого животного готовят по 2 мазка. Готовые мазки крови высушивают на воздухе; подсушивать их над пламенем или на солнце нельзя. В холодное время года мазки делают в теплом помещении или на стеклах, подогретых на крышке стерилизатора.
Правильно приготовленные мазки крови должны быть тонкие, равномерные, достаточной длины и заканчиваться за 0,5-1,0 см от края стекла.
2.3. При взятии пунктата из лимфатического узла животное хорошо фиксируют, на месте пункции выстригают шерсть, кожу протирают ватным тампоном, смоченным в растворе спирта или настойке йода. Левой рукой оттягивают лимфатический узел и удерживают большим и указательным пальцами левой руки. Затем вглубь узла вводят стерильную иглу, надевают на нее шприц и поршнем отсасывают лимфу. После шприц отсоединяют, иглу извлекают, а содержимое шприца выдавливают поршнем на предметное стекло, делая тонкие мазки, которые высушивают на воздухе.
2.4. На высушенных мазках крови и пунктата острым предметом или простым карандашом пишут номер, вид животного и дату приготовления мазка.
2.5. Материал от павших или убитых животных отбирают до наступления трупного окоченения.
2.6. Мазки упаковывают в чистую бумагу, патологический материал - во влагонепроницаемую тару и доставляют в лабораторию в день отбора.
3. Микроскопическое исследование
3.1. Из доставленного для исследования патологического материала делают по 2 мазка из каждого объекта.
3.1.1. Мазки из головного мозга готовят путем заключения мелких кусочков между предметными стеклами. После растирания помещенного между ними материала стекла разъединяют в противоположные стороны в горизонтальном направлении, в результате чего получаются два довольно тонких мазка. Мазки высушивают на воздухе.
3.1.2. Из паренхиматозных органов готовят мазки-отпечатки. Для этого
вырезанный острым скальпелем кусочек органа захватывают пинцетом и свободной поверхностью кусочка делают на стекле несколько тонких отпечатков, мазки-отпечатки высушивают на воздухе.
3.2. Мазки фиксируют этиловым спиртом 96° в течение 20 - 25 мин. или смесью этилового спирта и серного эфира в равных количествах – 10 -15 мин. После высушивания мазки окрашивают азур — эозином по Романовскому - Гимзе (краску разводят дистиллированной водой рН 7,0-7,2 - в соотношении 1:10) – 30 - 45 мин. (в зависимости от качества краски и температуры помещения), промывают дистиллированной водой рН 7,0-7,2 до исчезновения следов краски на фильтровальной бумаге, высушивают и
исследуют под иммерсионной системой микроскопа (х90). Качество окраски мазка определяют под микроскопом по окраске лейкоцитов. Если лейкоциты бледно окрасились или не окрасились, исследовать препарат бесполезно, необходимо применить другую серию краски.
3.3. При микроскопии обнаруживают бабезии в эритроцитах. Цитоплазма пироплазмид окрашивается в голубовато-синеватый цвет, глыбки хроматина - в красно-фиолетовый или красный.
4. Дифференциальная диагностика возбудителей и оценка результатов. Результат исследования считают положительным при обнаружении в препарате из исходного материале возбудителей пироплазмидозов.
5. Срок микроскопического исследования до 2 дней.
Начиная с 1998 года, в практику исследования бабезиоза входит метод ПЦР. Метод полимеразной цепной реакции позволил получить данные о систематическом положение паразитов рода выделенных в Болгарии, Египте, Южной Африки, Германии, Испании, Намибии. А также систематическое положение паразитов родов и Метод ПЦР подтверждает данные полученные данные и 1913; и 1932; 1935; 1938, (1998), об антигенном различие видов выделенных в разных географических ареалах.
Иногда с диагностической целью применяют химиотерапевтические препараты. Химиотерапевтический метод диагностики основан на специфическом противопироплазмидозном действии препаратов. Он применяется для дифференциации сходных по клинической картине болезней (для дифференциации бабезиоза от гематурии больному животному вводят гемоспоридин; при бабезиозе наступает улучшение, а при гематурии этот препарат является неэффективным).
Для установления диагноза на пироплазмидозы посмертно проводят патологоанатомическое вскрытие трупов, а также микроскопируют мазки крови, взятые из внутренних органов павших животных.
Клинические признаки имеют существенное диагностическое значение. При большинстве пироплазмидозов домашних животных имеются сходные симптомы: повышенная температура тела, анемичность и желтушность слизистых оболочек, гемоглобинуриия, отеки, угнетение, острое течение.
Диагноз ставится комплексно. Необходимо учитывать эпидемиологические данные: пребывание в эндемичной зоне, наличие укусов клещей, контакт с резервуарами инфекции и т. д. Клиническая диагностика затруднительна особенно на начальной стадии болезни, когда симптомы могут совпадать с признаками других инфекций. Длительная лихорадка в сочетании с анемией, гепатомегалией при отсутствии эффекта от применения антибактериальных средств является основанием для лабораторных исследований на бабезиоз.
Эффективным, но очень длительным методом является ксенодиагностика – перевивка исследуемой крови чувствительным лабораторным животным (спленэктомированным золотистым хомячкам). Требуется несколько недель прежде, чем у животных разовьется заболевание и бабезий можно будет выявить в мазке крови.
Лечение бабезиоза.
Общие принципы лечебно-профилактических мероприятий при пироплазмидозах. В борьбе с пироплазмидозами домашних животных предложен комплекс мероприятий, включающий лечение больных и профилактику здоровых животных, уничтожение клещей-переносчиков, изменение внешних условий в неблагоприятную для развития клещей сторону, повышение резистентности организма животных. Своевременное и правильное лечение больных животных, хорошие условия содержания, кормления и ухода за ними определяют успех терапевтического вмешательства при пироплазмидозах. Заболевших и подозреваемых в заболевании пироплазмидозами животных изолируют.
В начале заболевания, когда не удалось установить вид возбудителя пироплазмидоза, необходимо применять химиопрепараты широкого спектра действия (гемоспоридин, пироплазмин, флавакридин, азидин). К химиотерапевтическим препаратам в основном принадлежат синтетические средства, специфически действующие на паразитов и выделяемые ими токсины и стимулирующие защитные силы организма животных в борьбе с инвазионным началом. Некоторые химиопрепараты (трипансинь, гемоспоридин, беренил), обладая химиопрофилактическим свойством, предупреждают клиническое проявление болезней при своевременном их назначении животным.
В борьбе с пироплазмидозами домашних животных чаще применяют следующие химиопрепараты специфического действия.
Трипансинь (трипанблау) — порошок темно-синего цвета. Оказывает губительное действие на представителей сем. Piroplasmatidae, за исключением нутталлий и франсаиелл. Назначают в дозе 0,005 на 1 кг веса животного в форме 1%-ного подогретого до 35—37°С раствора внутривенно. Краску растворяют в 0,3—0,4%-ном растворе поваренной соли. Слабым и тяжело больным животным лечебную дозу препарата вводят в два приема через 12—24 часа. Срок годности препарата не ограничен.
Флаваргин (аргофлавин) — соединение трипафлавина и серебра. Порошок светло-коричневого цвета, назначают при пироплазмидозах животных (за исключением анаплазмоза и тейлериоза крупного рогатого скота). Препарат также выпускают в ампулах по 5—10 мл в виде 0,5%-ного раствора.
Пироплазмин (акаприн) — производные мочевины. Порошок желто-зеленоватого цвета, горького вкуса, без запаха, хорошо растворимый в воде, обладает политропным действием на пироплазмид животных (кроме анаплазм и частично тейлерий). Пироплазмин вводят внутримышечно или подкожно в форме 1 % раствора на дистиллированной воде.
Гемоспоридин (ЛП-2)—препарат мочевины. Белый кристаллический порошок, хорошо растворимый в воде при комнатной температуре. Растворы на свету синеют. Приготовленный для инъекции раствор фильтруют, но не стерилизуют. Препарат обладает политропным действием на возбудителей пироплазмидозов. Применяют подкожно в форме 1—2 % раствора на 1 %-ном растворе лимоннокислого натрия. Для химиопрофилактики животным можно вводить пипеткой 50 % водный раствор гемоспоридина в конъюнктивальный мешок глаза или в носовую полость в дозе 2—3 капли.
Наганин — препарат мочевины, представляет собой легкий порошок желтовато-розового цвета, хорошо растворимый в воде. Под влиянием света разлагается и становится токсичным, поэтому его хранят в банках в сухом темном месте. Этот препарат можно применять при бабезиозе и тейлериозе в дозе 0,03 на 1 кг веса животного внутривенно в форме 10 % водного раствора.
Азидин (Azidinum) Синоним: беренил. Противогемоспоридиозное средство. Представляет собой легкий аморфный порошок от желто-оранжевого до оранжевого цвета со слабым запахом. Хорошо растворим в воде, очень мало растворим в 95° спирте. Применяют как химиотерапевтическое средство при бабезиозе, пироплазмозе и франсаиеллезе, пироплазмидозах и трипаносомозе всех животных, угнетая в них синтез ДНК. Для теплокровных животных препарат токсичен. Максимально переносимая доза препарата для собак 10 мг/кг веса тела. Применяют подкожно и внутримышечно в форме 7 % водного раствора или на растворе 5 % глюкозы двукратно с интервалом 24 ч в дозе 0,003-0,0035 г на 1 кг массы животного. С профилактической целью вводят в дозе 0,002 г на 1 кг массы 1 раз в 10-14 дней. Слабым и истощенным животным его применяют в половинной лечебной дозе дважды с интервалом 12 часов. Упаковка: порошок в банках темного стекла. Хранят (список Б) в хорошо укупоренной таре в сухом, прохладном, темном месте в течение 3 лет.
Веренил — немецкий препарат, довольно широко используемый в нашей стране в борьбе с пироплазмидозами. Порошок желтого цвета, слаборастворимый в воде. Назначают при пироплазмозе, франсаиеллезе, бабезиозе в дозе 0,0035 с лечебной целью и 0,0015—0,0035 на 1 кг веса животного с профилактической целью в 7 % концентрации для внутримышечного или подкожного введения.
Верибен - растворимый порошок. Состав: Диминазин - ацетурат 1,05 г. Наполнитель до 2,36 г. Свойства: Верибен - эффективное антипаразитарное средство от пироплазмоза, трипаносомоза и трихомоноза. Его особая способность активизировать иммунную систему позволяет использовать его для профилактического применения. Показания: профилактика и лечение протозойных заболеваний, вызванных: трипаносомами (T. congolense, T. vivax, T. brucei), бабезиями (B. bovis, B. bugemina, B. ovis, B. motasi, B. canis, B. microti), трихомонадами (T. foetus), тейлерией T. annulata. Дозировка и способ применения: лечение трипаносомоза и пироплазмоза. Глубокое внутримышечное введение. Лечение крупного рогатого скота, овец, лошадей: Обычная дозировка: 0,05 мл на 1 кг веса тела. Развести в 15 мл стерильной воды содержимое конвертика (или флакона) - 2,36 г, чтобы получить инъекционный раствор. Перед применением хорошо встряхните. В большинстве случаев требуется лишь однократное применение. В тяжелых случаях введение препарата можно повторить через 24 часа после первой инъекции. Если приходится вводить большой объем препарата, то рекомендуется его разделить на две части и ввести в разные участки тела. Хранить препарат в сухом прохладном месте, при температуре ниже 23°С. Разведенный раствор можно хранить до 15 дней при температуре ниже 15°С в защищенном от света месте в закрытом стеклянном флаконе. Форма выпуска: флакон содержащий 0,5 г сухого вещества.
Трипонил - стерильный порошок для инъекций Состав в 1 флаконе (2,36 г): дименазин ацетурат 1,05 г, диметилфенилпиразолон 1,31 г. Описание: аморфный порошок желтого цвета, со слабым запахом, легко растворяется в воде, слабо растворим в спирте. Водные растворы (рН 6-6,5) устойчивы. Фармакологические свойства: трипонил обладает выраженным химиотерапевтическим действием при бабезиозах, пироплазмозах, трихомонозе, тейлериозе, франсаилезе и трипаносомозах животных, а также при смешанных инвазиях, не влияя на формирование иммунитета к возбудителю. Проникая внутрь клетки простейшего, Трипонил нарушает синтез белков и аминокислот (РНК, ДНК), а также изменяет биохимические процессы, тормозит дыхательные функции и разрушает пелликулу паразита, что приводит к его гибели. Максимально переносимая доза препарата для животных составляет 10 мг/кг живой массы тела. Терапевтическая концентрация препарата в различных органах и тканях организма достигается через 1-2 часа. Препарат выводится в виде основания с мочой. Показания к применению: профилактика и лечение протозоозов, вызванных простейшими рода Babesia (B. bovis, B. ovis), Francaiella (F. сolchica), Theileria (T. аnnulata), Trichomonas (T. foetus), Tripanosoma: (T. evansi, T. vivax, T. bruceli, T. congolese). Противопоказания: повышенная чувствительность к дименазин ацетурату и диметилфенилпиразолону. Побочные эффекты: в рекомендуемых дозах не оказывает местно-раздражающего действия и аллергических реакций. Дозировка и способ применения: перед применением растворить содержимое флакона до 15 мл водой для инъекций. Раствор готовят с учетом правил асептики и антисептики. Готовый раствор вводят внутримышечно или подкожно, из расчета 1 мл на 20 кг живой массы тела животного (т.е. 1 флакон на 300 кг). Вводится однократно. В случае необходимости, при тяжелых формах заболевания, повторить через 24 часа. Ослабленным животным лечебную дозу вводят в два приема с интервалом в 6 - 12 ч. Не рекомендуется вводить более 15 мл раствора на одно инъекционное место. Хранение: флаконы хранят в сухом, темном месте при температуре 15 - 25°С. Срок годности смотри на упаковке. Готовый раствор в закрытом флаконе сохраняет терапевтические свойства 14 дней при температуре 4 - 8°С. Форма выпуска: флаконы по 2,36 г, упакованные в коробки по 60 шт.
Профилактика бабезиозов.
Важными профилактическими противопироплазмидозными мерами являются:
1) недопущение контакта животных с клещами-переносчиками.
2) химиопрофилактика пироплазмидозов. Химиопрепараты вводят животным в неблагополучном районе при появлении первых случаев заболевания или через 7—10 дней после появления клещей на животных. Срок действия профилактической обработки 12—14 дней;
3) методы уничтожения клещей на животных и в помещениях;
4) искусственная иммунизация — введение животным ослабленных гемоспоридий (иногда одновременно с химиопрепаратами), имеет ограниченное применение.
Для повышения защитных сил организма животных необходимо соблюдать правила их кормления, содержания и ухода за ними.
Диагностика и профилактика новых клещевых инфекций – важная задача ветеринарных служб и органов здравоохранения во всем мире. Не вызывает сомнений необходимость проводить диагностические тесты на бабезиоз и другие клещевые инфекции, особенно у больных с тяжелым и средним проявлением или с атипичной гриппоподобной формой Лайм-боррелиоза в эндемичных зонах, неэффективности антибиотикотерапии или при устойчивой к лекарствам малярии. При выборе препаратов для лечения сочетанных инфекций необходимо учитывать тяжесть клинического течения и набор возбудителей.
Иммунитет при пироплазмидозах. Иммунитет при пироплазмидозах является нестерильным. Он сохраняется до тех пор, пока в организме переболевшего или искусственно иммунизированного животного находятся в небольшом количестве гемоспоридии, не проявляющие патогенного влияния (от нескольких месяцев до нескольких лет). Виды пироплазмид строго специфичны в отношении хозяев (теплокровных животных и клещей-переносчиков), поэтому иммунитет вырабатывается только против определенных видов (иногда только штаммов) и не предохраняет от других видов пироплазмид. Напряженность иммунитета и его продолжительность при пироплазмидозах зависят от общего состояния, условий кормления и содержания животных, наличия сопутствующих болезней и тяжести заболевания (при легком течении болезни иммунитет слабее и менее продолжителен). Длительность иммунитета в естественных условиях также поддерживается за счет реинвазии (повторного заражения животных через клещей). При отсутствии реинвазии иммунитет постепенно ослабевает ввиду снижения патогенности и вирулентности пироплазмид.
Опасность для человека.
Бабезиоз человека, вызванный B. microti, несмотря на широкое распространение этого возбудителя, встречается почти исключительно в США. Первый случай был описан в 1969 г. С тех пор в США зарегистрировано несколько сотен случаев, что значительно ниже заболеваемости другой клещевой инфекцией – Лайм-боррелиозом. Тем не менее, уровень заболеваемости бабезиозом в последние годы увеличивается, очевидно, вследствие улучшения диагностики. Предполагается, что значительная часть заболеваний остается недиагностированной в связи с преобладанием мягкого или бессимптомного течения.
В Европе, в отличие от Северной Америки, зарегистрированы лишь немногочисленные случаи бабезиоза человека, главным образом, с возбудителем B. divergens (во Франции, в Англии, Ирландии, Швейцарии, Швеции, бывшей Югославии, бывшем Советском Союзе). Всего известен 31 случай, в 26 возбудитель B. divergens, причем все больные были спленэктомированны.
Заболевания с возбудителем B. microti в Европе крайне редки. Предполагается, что европейские штаммы этого вида слабо патогенны для человека. Кроме того, отмечается тесная связь B. microti с клещом I. trianguliceps, не нападающим на человека. Не исключено, что столь низкий уровень заболеваемости в Европе в еще большей степени, чем в США, обусловлен недостаточным уровнем диагностики. Первое же масштабное серологическое исследование крови на наличие антител к бабезиям, проведенное в Германии, выявило высокий уровень серопозитивности среди людей, подвергавшихся укусам клещей, значительно превышающий серопозитивность части населения, не контактировавшей с клещами (11,5 и 1,7 % соответственно). Число серопозитивных к B. microti было почти вдвое выше, чем к B. divergens.
Данных по бабезиозу человека в России крайне мало. В бывшем СССР (Абхазия) летальный случай бабезиоза с B. divergens зарегистрирован в 1977 г. Штаммы B. microti в России выделены из клещей I. Ricinus и I. persulcatus, однако серологические исследования в эндемичной зоне лихорадящих больных с укусами таежного клеща не выявили антител к B. microti. Вопрос требует дальнейшего изучения.
Профилактика. Профилактика болезней, вызываемых В. microti, у человека затруднена. Лица, контактирующие с пораженными клещами животными, должны пользоваться отпугивающими насекомых средствами, содержащими диэтилтолуамид, и осматривать себя ежедневно на наличие нимф размером от 2 до 3 мм. Больным, перенесшим спленэктомию, не следует посещать эндемичные районы. В целях предупреждения трансфузионной передачи бабезиоза необходимо проводить серологический отбор доноров крови на наличие инфекции, вызываемой В. microti.
Список литературы.
1. Шевцов А. А. Ветеринарная паразитология. М.; 1965
2. Колабский Н. А. Бабезиозы. Ветеринарная энциклопедия, т. 1. М.; 1968
3. Машковский М. Д. Лекарственные средства. Вильнюс, 1993, т.2.
4. KrausePJ, etal. LymeDiseaseandBabesiosisCoifection. JAMA 1996; 275:1657-60. Источник: Русский Медицинский Журнал
5. Васильев И. К., Санин А. В. Бабезиоз собак. ГУ НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи РАМН, Москва
6. Рабинович С. А., Воронина З. К., Степанова Н. И. и др. Первое обнаружение бабезиоза человека в СССР и краткий анализ случаев, описанных в литературе. // Мед. паразитол. 1978. № 3. C. 97-107.
7. Алексеев А. Н. О возможности выявления еще одной клещевой инфекции – бабезиоза – на территории России. // Журн. Микробиол. 2003. №3. C. 39-43.
8. James J. Plorde. Babesiosis.
9. Хабиб О. Сочетание болезни Лайма с бабезиозом.
10.Васильева И. С. Заболевания, вызываемые клещами рода Ixodes. Институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е. И. Марциновского ММА им. И. М. Сеченова.
11.Васильев И. К. Эффективность Гамавита при лечении пироплазмоза собак. М.; 2005
12.Методические указания по лабораторным исследованиям на
пироплазмидозы животных. Министерство сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации. Департамент ветеринарии 16.12.96г. № 13-7-2/799.